Yeni Koronavirus (SARS-Cov-2) Nuklein Turşusu Təsbiti Kiti
New Coronavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit
(Flufilizscent RT-PCR Probe Method) Product Manual
【Product name 】Yeni Koronavirus(SARS-Cov-2) Nuklein Turşusu Aşkarlama Dəsti (Flüoresan RT-PCR Probe Metod)
【Packaging specifications 】25 Test/Dəst
【Intended usyaş】
Bu dəst nazofarengeal tamponlarda, orofaringeal (boğaz) tamponlarda, ön burun tamponlarında, orta turbin yaxmalarında, burun yuyulmalarında və burun aspiratlarında yeni koronavirusdan nuklein turşusunun keyfiyyətcə aşkarlanması üçün istifadə olunur. Yeni koronavirusun ORF1ab və N genlərinin aşkarlanması yeni koronavirus infeksiyasının köməkçi diaqnostikası və epidemioloji monitorinqi üçün istifadə edilə bilər.
【Principles of the procedure 】
Bu dəst xüsusi TaqMan zondları və yeni koronavirus (SARS-Cov-2) ORF1ab və N gen ardıcıllığı üçün nəzərdə tutulmuş xüsusi primerlər üçün nəzərdə tutulub. PCR reaksiya məhlulu hədəflərin spesifik aşkarlanması üçün 3 dəst xüsusi primer və flüoresan zonddan ibarətdir və əlavə xüsusi primerlər və flüoresan zondlar endogen təsərrüfat genlərinin aşkarlanması üçün dəstin daxili standart nəzarəti kimi istifadə olunur.
Test prinsipi ondan ibarətdir ki, spesifik flüoresan zond PCR reaksiyasında Taq fermentinin eksonükleaz fəaliyyəti ilə həzm olunur və deqradasiya olunur, beləliklə reportyor flüoresan qrupu və söndürülmüş flüoresan qrupu ayrılır ki, flüoresan monitorinq sistemi flüoresan qəbul edə bilsin. siqnal, və sonra PCR gücləndirilməsinin zənginləşdirmə effekti vasitəsilə zondun flüoresan siqnalı müəyyən edilmiş həddi-Ct dəyərinə çatır (Cycle threshold). Hədəf amplikon olmadığı halda, zondun reportyor qrupu söndürmə qrupuna yaxındır. Bu zaman flüoresan rezonans enerjisinin ötürülməsi baş verir və məruzəçi qrupunun flüoresansı söndürmə qrupu tərəfindən söndürülür ki, flüoresan siqnalı flüoresan PCR aləti ilə aşkarlana bilməz.
Sınaq zamanı reagentlərin istifadəsinə nəzarət etmək üçün dəst müsbət və mənfi nəzarət vasitələri ilə təchiz edilmişdir: müsbət nəzarətdə hədəf sahə rekombinant plazmid, mənfi nəzarət isə ətraf mühitin çirklənməsinə nəzarət etmək üçün istifadə olunan Distillə edilmiş sudur. Test zamanı müsbət və mənfi nəzarətin eyni vaxtda təyin edilməsi tövsiyə olunur.
【Main components 】
| Cat. No. | BST-SARS-25 | BST-SARS-DR-25 | Komponents | |
| Name | Xüsusifiksasiya | Kəmiyyətity | Kəmiyyətity | |
| Müsbət nəzarət | 180 μL / flakon | 1 | 1 | Süni şəkildə qurulmuş plazmidlər, Distillə edilmiş su |
| Mənfi nəzarət | 180 μL / flakon | 1 | 1 | Distillə edilmiş su |
| SARS-Cov-2 Qarışığı | 358,5 μL/flakka | 1 | / | Xüsusi primer cütləri, xüsusi aşkarlama flüoresan zondları, dNTP-lər, MgCl2, KCl, Tris-Hcl, Distillə edilmiş su və s. |
| Ferment qarışığı | 16,5 μL/flakka | 1 | / | Taq fermentləri, əks transkriptaza, UNG fermentləri və s. |
| SARS-Cov-2 Qarışığı (Liyofilləşdirilmiş) | 25 test / flakon | / | 1 | Xüsusi primer cütləri, xüsusi aşkarlama flüoresan zondları, dNTP-lər, Taq fermentləri, əks transkriptaza, Distillə edilmiş su və s. |
| 2x Bufer | 375 μL/flak | / | 1 | MgCl2, KCl, Tris-Hcl, Distillə edilmiş su və s. |
Qeyd:(1) Müxtəlif partiya dəstlərindəki komponentlər qarışdırıla və ya dəyişdirilə bilməz.
(2) Öz reagentinizi hazırlayın: Nuklein turşusu ekstraksiya dəsti.
【Storage conditions və expiration date 】
For BST-SARS-25:Uzun müddət -20±5℃ temperaturda daşıyın və saxlayın.
For BST-SARS-DR-25:Otaq temperaturunda daşınma. Uzun müddət -20±5 ℃ temperaturda saxlayın.
Təkrarlanan dondurma-ərimə dövrlərindən çəkinin. Etibarlılıq müddəti şərti olaraq 12 ay müəyyən edilmişdir.
İstehsal və istifadə tarixi üçün etiketə baxın.
İlk açıldıqdan sonra təkrar dondurma-ərimə dövrlərindən və reagentin dondurulma sayından qaçmaq üçün reagent -20±5°C-də 1 aydan çox olmayan müddətə və ya reagent dövrünün sonuna qədər (hansı tarix birinci gəlirsə) saxlanıla bilər. - ərimə dövrləri 6 dəfədən çox olmamalıdır.
【Applicable instrument】ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480.
【Sample requirements 】
1.Tətbiq edilə bilən nümunə növü: Çıxarılan nuklein turşusu məhlulu.
2.Nümunənin saxlanması və daşınması: 6 ay ərzində -20±5 ℃ temperaturda saxlayın. Nümunələri 6 dəfədən çox olmayan dondurun və əridin.
【Testing method】
1.Nucleic acid extraction
Viral nuklein turşusunu çıxarmaq üçün uyğun nuklein turşusu ekstraksiya dəstini seçin və müvafiq dəst təlimatlarına əməl edin. Yixin Bio-Tech (Guangzhou) Co., Ltd. tərəfindən istehsal olunan nuklein turşusu ekstraksiya və təmizləyici dəstdən və ya ekvivalent nuklein turşusu təmizləmə dəstindən istifadə etmək tövsiyə olunur.
2. Reaction reagent preparation
2.1 For BST-SARS-25:
(1) SARS-Cov-2 Qarışığını və Ferment Qarışığını çıxarın, otaq temperaturunda Vortex cihazı ilə yaxşıca əridin və sonra qısa müddətə sentrifuqa edin.
(2) 16,5uL Enzim Qarışığı 358,5uL SARS-Cov-2 Qarışığına əlavə edildi və qarışıq reaksiya məhlulu əldə etmək üçün hərtərəfli qarışdırıldı.
(3) Təmiz 0,2 mL PCR səkkizli boru hazırlayın və hər quyuya 15uL yuxarıda göstərilən qarışıq reaksiya məhlulu ilə işarələyin.
(4) 15 μL təmizlənmiş nuklein turşusu məhlulu, müsbət nəzarət və mənfi nəzarət əlavə edin və səkkizlik borunun qapağını diqqətlə bağlayın.
(5) Başı aşağı çevirərək yaxşıca qarışdırın və mayeni borunun dibində cəmləşdirmək üçün tez bir zamanda sentrifuqa edin.
1
2.2 For BST-SARS-DR-25:
( 1) Reaksiya qarışığını hazırlamaq üçün SARS-Cov-2 Qarışığına ((Liyofilləşdirilmiş) 375ul 2x Bufer əlavə edin. Pipetləmə yolu ilə hərtərəfli qarışdırın və sonra qısa müddətə sentrifuqa edin. （Reaksiya qarışığı hazırlandıqdan sonra onu -20°C temperaturda saxlamaq tövsiyə olunur. uzunmüddətli saxlama.)
(2) Təmiz 0,2 mL PCR səkkizli boru hazırlayın və hər quyuya 15μL reaksiya qarışığı ilə işarələyin.
(3) 15μL təmizlənmiş nuklein turşusu məhlulu, müsbət nəzarət və mənfi nəzarət əlavə edin və səkkizlik borunun qapağını diqqətlə örtün.
(4) Başı aşağı çevirərək yaxşıca qarışdırın və mayeni borunun dibində cəmləşdirmək üçün tez bir zamanda sentrifuqa edin.
3. PCR amplification （Əməliyyat parametrləri üçün alət təlimatına baxın.)
3. 1 PCR 8 borusunu floresan PCR alətinin nümunə kamerasına yerləşdirin və yüklənmə sırasına uyğun olaraq sınaqdan keçiriləcək nümunəni, müsbət nəzarəti və mənfi nəzarəti təyin edin.
3.2 Floresans aşkarlama kanalı:
(1) ORF1ab geni FAM-ın aşkarlama kanalını seçir (Reportyor: FAM, Quencher: Yoxdur).
(2) N geni VIC-nin aşkarlama kanalını seçir (Reportyor: VIC, Quencher: Yoxdur).
(3) Daxili standart gen CY5-in aşkarlama kanalını seçir (Reportyor: CY5, Quencher: Yoxdur).
(4) Passiv Referans ROX-a təyin edilib.
3.3 PCR proqramının parametrlərinin təyini:
| addım | Temperatur (℃) | Vaxt | Dövrlərin sayı | |
| 1 | Əks transkripsiya reaksiyası | 50 | 15 dəq | 1 |
| 2 | Taq fermentinin aktivləşdirilməsi | 95 | 2.5 dəq | 1 |
| 3 | Taq fermentinin aktivləşdirilməsi | 93 | 10 s | 43 |
| Tavlama uzadılması və flüoresan alınması | 55 | 30 s | ||
Quraşdırdıqdan sonra faylı yadda saxlayın və reaksiya proqramını işə salın.
4.Results analysis
Proqram başa çatdıqdan sonra nəticələr avtomatik olaraq saxlanılır və gücləndirmə əyrisi təhlil edilir. Gücləndirmə əyrisi alətin standart həddi ilə müəyyən edilir.
【Explanation of test results 】
1. Təcrübənin etibarlılığını müəyyən edin: Müsbət nəzarət FAM, VIC kanalı tipik gücləndirmə əyrisinə malik olmalıdır və Ct dəyəri ümumiyyətlə 34-dən azdır, lakin müxtəlif alətlərin müxtəlif həddi parametrlərinə görə dəyişə bilər. Mənfi nəzarət FAM, VIC kanalı gücləndirilməmiş Ct olmalıdır. Yuxarıda göstərilən tələblərin eyni vaxtda yerinə yetirilməli olduğu razılaşdırılır, əks halda bu test etibarsızdır.
2. Nəticə mühakimə
| FAM/VIC kanalı | Mühakimə nəticəsi |
| Ct＜37 | Nümunə testi müsbətdir |
| 37≤Ct＜40 | Gücləndirmə əyrisi S şəkillidir və şübhəli nümunələri yenidən yoxlamaq lazımdır; təkrar imtahan nəticələri uyğun olarsa müsbət, əks halda mənfi qiymətləndirilir |
| Ct≥40 Və ya Gücləndirmə yoxdur | Nümunə testi mənfidir (və ya dəstin aşkarlanmasının aşağı limitindən aşağıdır) |
Qeyd: (1) Əgər həm FAM kanalı, həm də VIC kanalı eyni vaxtda müsbətdirsə, SARS-Cov-2 müsbət olaraq təyin olunur.
(2) FAM kanalı və ya VIC kanalı müsbət, digər kanal isə mənfi olarsa, test təkrarlanmalıdır. Eyni zamanda müsbət olarsa, SARS-Cov-2 müsbət kimi qiymətləndiriləcək, əks halda SARS-Cov-2 mənfi kimi qiymətləndiriləcək.
Əlaqədar məhsullar
-
COVID-19 IgM/IgG Anticisim aşkarlama dəsti
COVID-19 IgM/IgG Anticisim Aşkarlama Dəsti （Kolloid Qızıl İmmunokromatoqrafiya Metodu) Məhsul Təlimatı 【MƏHSULUN ADI】COVID-19 IgM/IgG Anticisim aşkarlama dəsti （Kolloid qızıl immunoxromatoqrafiya metodu) 【PACIFKAGs/Sınaqlar/1 bu 【 ÖZET】 Yeni koronaviruslar β cinsinə aiddir. COVID-19 kəskin respirator yoluxucu xəstəlikdir. İnsanlar ümumiyyətlə həssasdırlar. Hazırda yeni növ koronavirusa yoluxan xəstələr əsas mənbədir...
-
Nuklein turşularının çıxarılması və ya təmizlənməsi dəsti
Nuklein turşusu ekstraktı və ya təmizlənmə dəsti və ya -20 ℃ temperaturda saxlanılır. Nümunə 0 ℃ qıvrımla daşınmalıdır. Giriş Nuklein turşusunun çıxarılması və ya təmizlənməsi dəsti (Maqnit muncuq metodu) avtomatlaşdırılmış nuklein turşusu ekstraksiya alətlərindən istifadə etməklə RNT və DNT-nin bədən mayelərindən (məsələn, tamponlar, plazma, serum) avtomatlaşdırılmış təmizlənməsi üçün nəzərdə tutulmuşdur. Maqnit hissəcik texnologiyası yüksək keyfiyyətli DNT/RNT təmin edir.
-
SARS-CoV-2 Antigen Təhlil Kiti （İmmunoxromatogr...
SARS-CoV-2 Antigen Təhlil Kiti (İmmunoxromatoqrafiya Metodu) Məhsul Təlimatları 【MƏHSULUN ADI】SARS-CoV-2 Antigen Təhlil Dəsti (İmmunoxromatoqrafiya Metod) 【QABLAMA XÜSUSİYYƏTLƏRİ】 1 Test/Kit corona virusuna aid deyil. COVID-19 kəskin respirator yoluxucu xəstəlikdir. İnsanlar ümumiyyətlə həssasdırlar. Hazırda yeni növ koronavirusa yoluxan xəstələr əsas...
-
SARS-CoV-2 Antigen Təhlil Kiti
SARS-CoV-2 Antigen Təhlili Dəsti (İmmunoxromatoqrafiya Metodu) Məhsul Təlimatı 【MƏHSULUN ADI】SARS-CoV-2 Antigen Təhlili Dəsti (İmmunokromatoqrafiya Metodu) 【QABLAMA XÜSUSİYYƏTLƏRİ】 1 Test/Kit, 25TRABITs/AKTEST, 】 The yeni koronaviruslar β cinsinə aiddir. COVID-19 kəskin respirator yoluxucu xəstəlikdir. İnsanlar ümumiyyətlə həssasdırlar. Hazırda yeni koronavirusa yoluxmuş xəstələr əsas infeksiya mənbəyidir; asemptomatik yoluxmuş insanlar...